Vannak más módszerek a PCR termékek tisztítására?

2024 Szerző: Miles Stephen | [email protected]. Utoljára módosítva: 2023-12-15 23:37

Azokhoz az alkalmazásokhoz, amelyek megkövetelik PCR tisztítása vagy érvényesítése PCR eredmények, ott ketten mód általában követik: PCR termék izolálás oszlop és gél segítségével tisztítás agaróz gélből.

Itt milyen típusú kromatográfiát használnak a PCR-termékek tisztítására?

A PCR-termékek tisztítására méretkizárásos kromatográfiát alkalmazunk. Ez befogja a kis molekulákat, például a fehérjét, alapozók , és nukleotidok, míg a nagy molekulák, például a PCR-termékek túl nagyok ahhoz, hogy bejussanak a gyöngyökbe, és átjussanak az oszlopon a gyűjtőcsövekbe.

Illetve hogyan tisztítod a DNS-t? Alapvetően megteheti megtisztítani a ti DNS mintákat a sejt- és/vagy szövetminták legmegfelelőbb eljárással (mechanikai roncsolás, kémiai kezelés vagy enzimatikus emésztés) történő lizálással, a nukleinsavak szennyezőanyagaitól való elkülönítésével és megfelelő pufferoldatban történő kicsapásával.

Ezenkívül miért tisztítjuk a PCR terméket?

Tisztítás DNS-t a PCR A reakció jellemzően a későbbi felhasználáshoz szükséges, és megkönnyíti az enzimek, nukleotidok, primerek és pufferkomponensek eltávolítását. Az általánosan használt módszerek szilícium-dioxid mátrixot tartalmazó spin oszlopokat alkalmaznak, amelyekhez a DNS szelektíven köthető kaotróp sók jelenlétében.

Miért kell a DNS-t megtisztítani?

Mi tiszta fel DNS vizes oldatokból a puffersók, enzimek vagy egyéb anyagok eltávolítására, amelyek hatással lehetnek a későbbi alkalmazásokra. Ilyen például a PCR reakció tiszta fel, tiszta fel a restrikciós emésztések után és tiszta genomi vagy plazmid felfelé DNS sejtfehérjékkel/törmelékkel szennyezett.