Hogyan nyerik ki a DNS-t a növényi szövetekből?
Hogyan nyerik ki a DNS-t a növényi szövetekből?

Videó: Hogyan nyerik ki a DNS-t a növényi szövetekből?

Videó: Hogyan nyerik ki a DNS-t a növényi szövetekből?
Videó: Isolation of Genomic DNA from Plant Tissue 2024, November
Anonim

A sejtfalakat meg kell törni (vagy le kell emészteni), hogy felszabaduljanak a sejtösszetevők. Ez általában csiszolással történik a szövet szárazjégben vagy folyékony nitrogénben mozsárral és mozsártörővel vagy élelmiszerdarálóval. A sejtmembránokat meg kell bontani, hogy a DNS kiengedik a kitermelés puffer.

Hasonlóképpen feltehetjük a kérdést, hogy melyek a DNS-kivonás módszerei?

Néhány a leggyakoribb DNS-kivonási módszerek közé tartozik a bio kitermelés , Chelex kitermelés és szilárd fázis kitermelés . Ezek mód következetesen izolált DNS , de mind minőségben, mind mennyiségben különböznek DNS engedett.

Tudja azt is, hogyan működik a CTAB DNS-kivonás? CTAB valamikor ezelõtt a legjobb mosószerként hozták létre a kitermelés / elkülönítés erősen polimerizált DNS növényi anyagból. Ez a detergens egyidejűleg szolubilizálja a növényi sejtfalat és a belső organellumok lipidmembránjait, és denaturálja a fehérjéket (enzimeket).

A fentieken kívül hogyan készíthet DNS-kivonási puffert?

DNS extrakciós puffer : 0,1 M EDTA-t (pH 8), 1% SDS-t és 200 µg/ml proteináz K-t tartalmaz. Készíts 50 ml 0,1 M EDTA-1% SDS törzsoldat 10 ml EDTA pH 8, 5 ml 10% SDS és 35 ml MilliQ víz elegyítésével 50 ml teljes térfogatra. Vortexeléssel jól összekeverjük.

Mi a DNS-kinyerés 4 alapvető lépése?

Az DNS-kivonási folyamat felszabadít DNS a sejtből, majd elválasztja a sejtfolyadéktól és a fehérjéktől, így tiszta marad DNS . A három alapvető lépések nak,-nek DNS kivonás 1) lízis, 2) kicsapás és 3) tisztítás.

A DNS-kivonás alapjai

  1. 1. lépés: lízis.
  2. 2. lépés: Csapadék.
  3. 3. lépés: Tisztítás.

Ajánlott: