Miért használnak nitrocellulóz membránt a Southern blotting során?
Miért használnak nitrocellulóz membránt a Southern blotting során?

Videó: Miért használnak nitrocellulóz membránt a Southern blotting során?

Videó: Miért használnak nitrocellulóz membránt a Southern blotting során?
Videó: Korda Masterclass 8: Winter Carp Fishing | Danny Fairbrass (2021) 2024, November
Anonim

Az eredeti jegyzőkönyvben nitrocellulóz membrán volt használt a blottolás esetében Southern blot de az utóbbi időben nejlon membránok számára valósítottak meg blottolás folyamat, mivel több mennyiségű DNS-t képesek hatékonyan megkötni, ami lehetővé teszi a Southern blot kevesebb mennyiséggel kell elvégezni

Ennek megfelelően miért használnak nitrocellulóz membránt a blottoláshoz?

Nitrocellulóz membránok népszerű mátrix használt fehérjében blottolás magas fehérjekötő affinitásuk, különféle kimutatási módszerekkel (kemilumineszcencia, kromogén és fluoreszcencia) való kompatibilitásuk, valamint fehérjék, glikoproteinek vagy nukleinsavak immobilizálásának képessége miatt.

Továbbá, miért kerül át a DNS nejlon membránra? 0,4 M NaOH felhasználásával átruházás oldószer a gél savban történő rövid előkezelését követően, DNS alatt depurinálódik átruházás . Kitettsége DNS ultraibolya fényre, akár a gélben, akár azt követően átruházás nak nek nylon membrán , csökkenti hibridizációs képességét.

Ezenkívül mi a Southern blotting célja?

A Southern blot A molekuláris biológiában alkalmazott módszer egy adott DNS-szekvencia kimutatására DNS-mintákban. Southern blotting kombinálja az elektroforézissel elválasztott DNS-fragmensek szűrőmembránra való átvitelét, majd az ezt követő fragmentum detektálást próba hibridizációval.

Hogyan segít a Southern blotting a törvényszéki vizsgálatokban?

A Southern blot , amelyet feltalálójáról, Edwinről neveztek el Déli , egy olyan módszer, amellyel ellenőrizhető egy adott DNS-szekvencia egy DNS-mintában. Miután az egyén DNS-ét egy specifikus restrikciós enzimmel megemésztettük, a kapott fragmentumokat a Southern blot elemzés.

Ajánlott: