Tartalomjegyzék:

Hogyan találja meg a DNS koncentrációját az abszorbancia alapján?
Hogyan találja meg a DNS koncentrációját az abszorbancia alapján?

Videó: Hogyan találja meg a DNS koncentrációját az abszorbancia alapján?

Videó: Hogyan találja meg a DNS koncentrációját az abszorbancia alapján?
Videó: Terrence Deacon Reveals the Hidden Connection: Consciousness & Entropy 2024, November
Anonim

DNS koncentráció mérésével becsüljük meg abszorbancia 260 nm-en, az A beállításával260 zavarosság mérése (mérés: abszorbancia 320 nm-en), megszorozva a hígítási tényezővel, és azt az összefüggést használva, hogy egy A260 1,0 = 50 µg/ml tiszta dsDNS.

Hasonlóképpen, az emberek azt kérdezik, hogyan találja meg a DNS koncentrációját?

Az eredeti mintában lévő DNS-koncentráció meghatározásához végezze el a következő számítást:

  1. dsDNS koncentráció = 50 μg/mL × OD260 × hígítási tényező.
  2. dsDNS koncentráció = 50 μg/ml × 0,65 × 50.
  3. dsDNS koncentráció = 1,63 mg/ml.

Továbbá, mi a jó DNS-koncentráció? A jó minőség DNS A mintán legyen A260/A280 az arány 1,7-2,0 és egy A260/A230 aránya nagyobb, mint 1,5, de mivel a különböző technikák érzékenysége ezekre a szennyeződésekre eltérő, ezeket az értékeket csak iránymutatónak kell tekinteni a minta tisztaságára vonatkozóan.

Ilyen módon a DNS abszorbeál 280 nm-en?

Az abszorbancia aránya 260-nál nm vs 280 nm az értékelésére általában használják DNS a fehérjeoldatok szennyeződése, mivel a fehérjék (különösen az aromás aminosavak) elnyel fény at 280 nm.

Hogyan használja a NanoDrop-ot DNS-koncentrációhoz?

Alapvetően a nanocsepp választási lehetőséget ad DNS , RNS, fehérjék. Ki kell választani DNS , majd öntsön 2 ΜL vizet (mili Q preferencia), válassza az "Üres" lehetőséget, majd helyezzen még 2 ΜL vizet, hogy megbizonyosodjon arról, hogy a mérték 0. Ezután helyezzen be 2 ΜL-t a mintából. Megkapod a mérést.

Ajánlott: